Nghiên cứu và hướng dẫn trồng nấm thượng hoàng

Trồng nấm thượng hoàng

Nấm thượng hoàng ( hoàng linh chi ) cũng như những chủng nấm khác trong ngành linh chi như hồng linh chi, xích linh chi… là loại dược liệu vô cùng quý, có tác dụng tăng sức đề kháng, tăng hệ miễn dịch, giảm mỡ máu, cholesterol, chúng có tác dụng mạnh mẽ trong phòng chống hỗ trợ nhiều loại bệnh nguy hiểm như gan nhiễm mỡ, viêm gan A,B,C , Tim mạch, bệnh hô hấp, bệnh mất ngủ, ung thư…

Vì những tác dụng tuyệt vời của mình các loại nấm linh chi ( nấm lim xanh ) trong đó có nấm thượng hoàng đã được các nhà khoa học nghiên cứu, phân lập và tiến hành nuôi trồng trong môi trường nhân tạo. Tuy chưa phổ biến bằng các loại nấm linh chi khác như hồng linh chi, xích linh chi nhưng nấm thượng hoàng cũng đã bắt đầu được du nhập và trồng tại Việt Nam. Nhưng kỹ thuật trồng nấm thượng hoàng như thế nào? các yếu tố ảnh hưởng đến chất lượng của nấm thượng hoàng nuôi trồng là gì?

Kiến Phúc Đường là đơn vị nghiên cứu, sản xuất, phân phối, thương mại và chuyển giao công nghệ trồng nấm dược liệu hàng đầu Việt Nam, với sự giúp đỡ của nhiều chuyên gia trong và ngoài nước chúng tôi đã có nhiều công trình nghiên cứu, ứng dụng sản xuất nấm dược liệu quý hiếm. Những chủng giống đặc biệt, được chọn lựa trong và ngoài nước được sưu tập, phân lập và thử nghiệm sản xuất kỹ lưỡng đảm bảo chất lượng sản phẩm có dược tính cao nhất.

 

Ngày hôm nay Kiến Phúc Đường xin gửi đến các bạn nghiên cứu khoa học: các điều kiện nuôi trồng ảnh hưởng thế nào đối với nấm thượng hoàng. Đây cũng có thể coi là cẩm nang hướng dân trồng nấm thượng hoàng của chúng tôi xin trân trọng chia sẻ với cộng đồng. Hy vọng cộng đồng nấm dược liệu Việt Nam nói riêng, cộng đồng nam dược nói chung ngày càng phát triển để người Việt Nam ngày càng được tiếp xúc với nhiều loại dược phẩm tốt hơn theo như kim chỉ nam khi thành lập của Kiến Phúc Đường.

Xem thêm để biết Nấm Thượng Hoàng là gì, Nấm Thượng Hoàng có tốt không

Nấm thượng hoàng

I. Nấm thượng hoàng và tình hình nuôi trồng nấm thượng hoàng hiện nay.

Càng ngày, nấm thượng hoàng càng được công nhận với khả năng làm thực phẩm chức năng và là nguồn dược liệu tuyệt vời. Trong các loại nấm dược liệu thì nấm thượng hoàng nổi lên là loại nấm có dược hiệu cao nhất, thơm ngon nên có giá trị cao hàng đầu. Nấm thượng hoàng hiện đang được trồng tại nhiều quốc gia, đặc biệt là các quốc gia châu á như Hàn Quốc, Nhật Bản, tại Việt Nam cũng có nhiều nghiên cứu nuôi trồng nhưng chưa phát triển rộng rãi. Nấm thượng hoàng thuộc Chi Phellinus thuộc họ Hymenochaetaceae, đã được công nhận hơn một thế kỷ ( Quelet, 1886 ). P. linteus , lần đầu tiên được chỉ định là Polyporus linteus ( Berkeley và Curtis, 1860 ) là một ví dụ của nấm thượng hoàng Phellinus các loài có hoạt động kháng u và điều hòa miễn dịch. Hoạt động kháng u trung gian vật chủ đáng chú ý chống lại ung thư ghép ở động vật được mô tả lần đầu tiên (với tên gọi Sarcoma 180) cách đây 40 năm ( Ikekawa et al., 1968 ). Loại nấm này, chủ yếu sống trên cây dâu tằm và sống lâu năm ở Hàn Quốc, đã được gọi là “Sanghuang (polyporus vàng)” trong hàng trăm năm trong y học cổ truyền Trung Quốc (Chen và Chen, 2000). Nhiều nghiên cứu được thực hiện bằng cách sử dụng nấm thượng hoàng P. linteus đã phân lập được các chất thiết yếu có khả năng kích thích hệ thống miễn dịch của con người ( Chung và Kim, 1994 ; Lee và cộng sự, 1996 ; Song và cộng sự, 1998 ).

Các đặc điểm sinh lý, thành phần hóa học và sự phát triển của các phương pháp canh tác liên quan đến P. linteus và các thành viên khác của chi này đã được báo cáo ( Chi và cộng sự, 1996 ; Jung và cộng sự, 1997 ). Basidiocarps của P. linteus (Polyporus thuốc màu vàng), xuất hiện tự nhiên với độ hiếm, được đánh giá cao về hoạt tính chống khối u của phức hợp protein-polysaccharide hoạt tính sinh học ( Oh và Han, 1993 ). Mặc dù có giá trị y học lớn như vậy và chúng hiếm gặp trong tự nhiên, nhưng việc nuôi cấy nhân tạo P. linteus về cơ bản vẫn chưa được kiểm chứng.

Nghiên cứu này được thực hiện để điều tra các đặc điểm sinh lý cần thiết cho sự phát triển của sợi nấm và đặc biệt là khám phá quá trình sản xuất nhân tạo P. linteus bằng cách sử dụng các khúc gỗ Dâu tằm ( Morus alba )

II. Nguyên liệu và phương pháp

1. Môi trường nuôi cấy, cấy và xác định mức tăng trưởng tối ưu

Nấm thượng hoàng Phellinus linteus ATCC 26710 được nuôi cấy ở nhiệt độ 25 sl trên thạch men-mạch nha (YMA). Mỗi phiên bản của môi trường bao gồm 0,5% peptone, 0,3% chiết xuất nấm men, 0,3% chiết xuất mạch nha, 1% dextrose, và 2% thạch trong 1 l . Môi trường được khử trùng bằng cách hấp (121 ℃, 15 psi, 15 phút) trong môi trường vô trùng được đổ vào đĩa Petri. Một phần sợi nấm được cấy trên thạch đã nguội, cung cấp chất cấy cho bước tiếp theo. Nuôi cấy được thực hiện thường xuyên 30 ngày một lần. Bốn phương tiện nuôi cấy khác nhau (Bảng 1) được sử dụng để xác định môi trường ưa thích sự phát triển tối ưu của P. linteus . Sau 14 ngày phát triển trên YMA, sợi nấm của nấm được cấy vào tâm của 5 đĩa Petri chứa thạch bằng cách sử dụng sâu đục thân có đường kính 5 mm vô trùng. Sau 14 ngày ủ ở 25 ℃, mức độ phát triển của sợi nấm được quan sát thấy.

Bảng 1: Thành phần của phương tiện được sử dụng

* MCM (Môi trường hoàn chỉnh từ nấm), MEA (Thạch chiết xuất mạch nha), PDA (Thạch khoai tây Dextrose), YMA (Thạch mạch nha men)

2. Ảnh hưởng của nhiệt độ đến sự phát triển của sợi nấm

Ảnh hưởng của nhiệt độ đến sự phát triển của sợi nấm được thực hiện bằng cách sử dụng môi trường được xác định là tối ưu. Sau khi hấp tiệt trùng, môi trường được đổ vô trùng vào năm đĩa Petri và tiến hành cấy giống như mô tả ở trên. Quá trình ủ được thực hiện trong 14 ngày ở 20 ℃, 25 ℃, 30 ℃, 35 ℃ và 40 ℃, trước khi quan sát sự phát triển của sợi nấm.

3. Ảnh hưởng của pH đến sự phát triển của sợi nấm

Ảnh hưởng của pH đến sự phát triển của sợi nấm đã được nghiên cứu bằng cách đo khối lượng khô của sợi nấm. Môi trường lỏng được sử dụng và nhiệt độ được sử dụng là nhiệt độ tối ưu đã xác định trước đó. Môi trường được điều chỉnh đến pH 4 ~ 8 bằng NaOH 1 N hoặc HCl trước khi được phân phối vào các bình nuôi cấy 250 ml với tỷ lệ 50 ml mỗi bình và sau đó được hấp áp lực. Chất cấy được thu nhận bằng cách nuôi cấy nấm trong 14 ngày trong đĩa Petri có chứa môi trường YMA. Sau khi cấy sợi nấm, mỗi bình được ủ ở 25 ℃ trong 14 ngày. Sợi nấm được lọc qua giấy lọc Whatman số 2 có đường kính 9 cm, được làm khô trong tủ sấy ở 85 ℃ trong 24 giờ, làm nguội trong bình hút ẩm và cân.

4. Ảnh hưởng của nguồn carbon đến sự phát triển của sợi nấm

Việc sử dụng nguồn carbon của P. linteus đã được thử nghiệm như mô tả trước đây (môi trường của Lilly & Barnett) bằng cách sử dụng các phiên bản sửa đổi (đối với nguồn carbon) của môi trường được mô tả (10 g glucose, 2 g asparagin, 1 g KH 2 PO 4 , 0,5 g MgSO 4 · 7H 2 O, 20 g thạch trong 1 lnước cất). Nhiều nguồn cacbon khác nhau đã được thay thế cho glucose. Dựa trên trọng lượng phân tử của 13 nguồn cacbon khác nhau, mỗi nguồn được thêm vào môi trường cơ bản để đạt được nồng độ 0,1M. Môi trường cơ bản được điều chỉnh đến pH 6.0 và sau đó được hấp tiệt trùng. Cellobiose và xylose được khử trùng bằng phương pháp lọc Millipore ™ để tránh sự phân hủy do kích thích nhiệt của chúng thành glucose và furfural tương ứng. Chất cấy được thu nhận bằng cách nuôi cấy nấm trong 14 ngày trong đĩa Petri có chứa môi trường cơ bản. Năm đĩa Petri của mỗi nguồn cacbon được cấy vào đĩa nấm có đường kính 5 mm. Năm đĩa Petri của môi trường cơ bản không có carbon cũng được cấy như đối chứng. Sau khi ủ ở 25 ℃ trong 14 ngày, đường kính khuẩn lạc của sợi nấm được đo như mô tả ở trên.

5. Ảnh hưởng của nguồn nitơ đến sự phát triển của sợi nấm

Khả năng sử dụng các nguồn nitơ khác nhau để tăng trưởng của nấm thượng hoàng P. linteus đã được nghiên cứu. Ngoại trừ việc thay thế 1% fructoza (trên L) làm nguồn cacbon, môi trường cơ bản vẫn giữ lại thành phần được sử dụng để xác định nguồn cacbon. Mười hai nguồn nitơ được thay thế cho asparagin; dựa trên trọng lượng phân tử riêng lẻ của chúng, mỗi chất được phân phối vào môi trường cơ bản để đạt được nồng độ 0,02 M. Môi trường cơ bản được điều chỉnh đến pH 6,0 và được hấp tiệt trùng. Tất cả các quy trình khác bao gồm cấy, ủ và đo lường sự phát triển của sợi nấm được thực hiện như đã mô tả để xác định nguồn carbon.

6. Chuẩn bị meo giống và trồng nấm

Quá trình sản xuất basidiocarp của P. linteu s bao gồm hai giai đoạn chính. Giai đoạn đầu tiên bao gồm việc chuẩn bị môi trường nuôi cấy giống, meo giống mẹ và meo nấm trồng, và giai đoạn thứ hai là chuẩn bị giá thể tăng trưởng cho việc trồng nấm. Để chuẩn bị meo giống, mùn cưa cây Dâu được trộn với cám gạo theo tỷ lệ 4: 1 và điều chỉnh độ ẩm khoảng 65%. Môi trường đã trộn được cho vào bình 250 ml và được khử trùng ở 121 ℃ trong 45 phút. Sau khi làm nguội đến 20 ℃, một phần sợi nấm từ đĩa thạch được cấy vào môi trường mùn cưa này để làm chất cấy cho meo nấm trồng. Môi trường cấy meo được chuẩn bị bằng cách thêm môi trường chứa mùn cưa và cám gạo đã chuẩn bị như mô tả ở trên vào 850 mlchai polyetylen. Sau khi khử trùng ở 121 ℃ trong 90 phút và làm lạnh đến 20 ℃, hai hoặc ba thìa chất cấy của môi trường mùn cưa đã được nuôi cấy (meo giống mẹ) được lấy từ bình 250 ml được thêm vào. Mỗi môi trường mùn cưa đã cấy được ủ ở nhiệt độ 25 ℃ trong khoảng 45 ngày cho đến khi các sợi nấm được quan sát thấy đã lan hoàn toàn trên môi trường.

Sợi nấm lấy được đã cung cấp chất cấy cho quy trình trồng dâu tằm. Phương pháp canh tác P. linteus liên quan, theo thứ tự, lựa chọn và chặt cây, cưa / cắt khúc gỗ thành các đoạn ngắn, chuyển các đoạn vào túi polyetylen, khử trùng, cấy giống, chuẩn bị và sử dụng meo giống, chôn khúc gỗ trong đất, và chăm sóc quả thể trong quá trình phát triển từ giai đoạn đầu nhọn đến trưởng thành.

Để chọn các khúc gỗ tự nhiên thích hợp cho việc trồng nấm P. linteus , tỷ lệ giảm carbon / nitơ (C / N) của mùn cưa được đo bằng máy phân tích nguyên tố Model CHN-1000 (Leco, St. Joseph, MI, USA). Giá thể được chuẩn bị bằng mùn cưa của Dâu tằm ( M. alba ), Sồi ( Quercus acutissima ), Suwon-Populus ( Populus euamericana ) và Hạt dẻ ( Castanea crenata)). Độ ẩm của mỗi môi trường mùn cưa được điều chỉnh khoảng 65%. Năm mươi gam của mỗi môi trường được đưa vào cột (Ø 3,0 × 20,0 cm) và được khử trùng ở 121 ℃ trong 60 phút. Sau khi làm nguội đến 20 ℃, một thìa môi trường mùn cưa đã được nuôi cấy được cấy vào cột của môi trường mùn cưa. Mỗi môi trường đã cấy được ủ trong phòng tối với các thông số sinh trưởng được kiểm soát. Sau 40 ngày ủ, đo tỷ lệ C / N của mùn cưa.

Để cấy các đoạn khúc gỗ ngắn đã được khử trùng, các khúc gỗ tự nhiên đã chọn được cắt theo chiều dài khoảng 60 cm được cho vào túi polyetylen chịu nhiệt và được đậy bằng nút bông. Thành phần của mỗi túi được khử trùng bằng cách hấp tiệt trùng (121 ℃, 15 psi, 2 giờ) và sau đó làm lạnh đến 20 ℃. Cấy giống được thực hiện bằng phương pháp cấy giống trên cùng, trong đó 0,5 cm (20 ~ 30 g) độ dày của chất cấy của sợi nấm mùn cưa (meo giống trồng) được để trên đỉnh của một khúc gỗ đã cắt và bịt kín bằng nút bông. Các bản ghi đã cấy được ủ trong phòng tối với các thông số sinh trưởng được kiểm soát. Sau một tháng ủ, sự phát triển của sợi nấm được quan sát thấy.

7. Ảnh hưởng của kích thước khúc gỗ và độ ẩm

Các khúc gỗ được cắt thành các đoạn dài 20 cm, 30 cm, 40 cm, 50 cm và 60 cm và được cho riêng vào túi polyetylen. Quá trình khử trùng và cấy đã được thực hiện như đã mô tả ở trên. Sau 2 tháng ủ, sự phát triển của sợi nấm được quan sát thấy. Độ ẩm của các khúc gỗ có kích thước khác nhau được điều chỉnh thành 35%, 40% hoặc 42%. Các khúc gỗ có độ ẩm 35% được chuẩn bị bằng cách phơi khô trong 3 ~ 4 tháng sau khi chặt cây được sử dụng làm đối chứng. Các khúc gỗ có độ ẩm 40% được tạo ra bằng cách ngâm các khúc gỗ khô trong nước trong một ngày, trong khi độ ẩm 42% được tạo ra bằng cách thêm nước vào các khúc gỗ ngập nước trong một ngày. Cấy và ủ được thực hiện như mô tả ở trên. Sau 4 tháng ủ, sợi nấm phát triển được.

8. Thời gian khử trùng của chất nền (nhật ký ngắn)

Các khúc gỗ ngắn có đường kính khoảng 15 cm và chiều dài khoảng 20 cm được đặt trong các túi polyetylen, có gắn cổ vòng và được cắm bằng bông để trao đổi khí. Các bản ghi được khử trùng bằng cách hấp tiệt trùng (121 ℃ và 15 psi), trong 8, 10, 12 hoặc 14 giờ. Các sinh sản mùn cưa đã được tạo khuẩn lạc (giống cấy) có độ dày 0,5 cm được cấy lên trên các khúc gỗ ngắn đã khử trùng bằng phương pháp cấy sinh sản trên cùng được mô tả ở trên. Sau 6 tháng ủ, sự phát triển của sợi nấm được quan sát thấy.

9. Ảnh hưởng của các chất bổ sung

Các khúc gỗ ngắn thu được như mô tả ở trên đã được đặt trong các túi polyetylen đã được bổ sung các chất bổ sung lên trên các khúc gỗ trước khi cắm. Chúng bao gồm mùn cưa cây Dâu tằm, mùn cưa cám gạo (4: 1 v / v), lá cây Dâu tằm và lá cây dâu tằm – cám gạo (4: 1 v / v). Sau khi khử trùng (121 ℃, 15 psi, 14 giờ), việc cấy giống được thực hiện thông qua sinh sản đỉnh. Sau 3 tháng ủ, sự phát triển sợi nấm của các khúc gỗ ngắn đã được quan sát thấy.

10. Ảnh hưởng của thời gian ủ, nhiệt độ nuôi trồng, độ ẩm tương đối và độ sâu chôn lấp đến sự phát triển của nấm

Các bản ghi đã cấy được đặt trong phòng tối ở nhiệt độ 22 ~ 25 ℃ và độ ẩm tương đối 65 ~ 70%, và được ủ trong 3, 4, 5 hoặc 6 tháng. Các bản ghi được chôn trong đất trong nhà trồng nấm và sự hình thành quả thể được đánh giá sau các thời gian ủ khác nhau. Những khúc gỗ có nhiều sợi nấm được lấy ra từ các túi polyetylen và chôn thẳng đứng trong đất trong nhà trồng nấm. Nhiệt độ nhà trồng trọt được kiểm soát ở 20 ~ 25 ℃, 26 ~ 30 ℃ hoặc 31 ~ 35 ℃. Sự hình thành đầu nhọn của nấm được đánh giá ở mỗi khoảng nhiệt độ. Các khúc gỗ có hệ sợi nấm được chôn trong đất của một ngôi nhà trồng nấm có nhiệt độ được duy trì ở mức 31 ~ 35 ℃. Độ ẩm tương đối của nhà trồng trọt được duy trì ở mức 80 ~ 90%, 91 ~ 95% hoặc 96 ~ 99%.Sự hình thành quả thể được đánh giá trong từng điều kiện độ ẩm tương đối. Các khúc gỗ được khai thác tốt được chôn theo chiều dọc có chiều dài 1/4, 1/2 chiều dài hoặc 3/4 trong đất nhà trồng trọt ở 31 ~ 35 ℃ với độ ẩm tương đối 96 ~ 99%. Sự hình thành đầu nhọn của nấm được đánh giá ở mỗi độ sâu chôn lấp.

III. Kết quả và thảo luận

1. Lựa chọn môi trường nuôi cấy tối ưu

Bốn môi trường nuôi cấy khác nhau được sử dụng để đánh giá sự phát triển của P. linteus . Sự phát triển của sợi nấm rất tốt trên MCM, với đường kính khuẩn lạc là 70,2 mm đạt được sau 14 ngày ủ (Hình 1). Đường kính khuẩn lạc trong khoảng 40,2 ~ 45,7 mm thể hiện rõ trên thạch chiết xuất mạch nha, thạch mạch nha men và thạch khoai tây dextrose.

Hình 1: Sự phát triển của nấm thượng hoàng theo nhiệt độ.

3. Ảnh hưởng độ PH đến sự phát triển của nấm

Theo đánh giá của trọng lượng khô của sợi nấm, pH 6,0 ~ 7,0 là thuận lợi nhất cho sự phát triển của P. linteus, phù hợp với các quan sát trước đây (Chi và cộng sự, 1996). Sự phát triển của sợi nấm là tối ưu ở pH 6,0, với trọng lượng khô là 74,2 mg, trong khi sự phát triển bất lợi nhất ở pH 4,0 (Hình 3). Sự giảm độ pH của môi trường là một đặc điểm của sự phát triển của nấm và do đó, sự phát triển của sợi nấm có thể giảm theo thời gian.

4. Ảnh hưởng của nguồn carbon đến sự phát triển của sợi nấm

Mười trong số 13 nguồn carbon được thử nghiệm thuận lợi cho sự phát triển sợi nấm của P. linteus so với đối chứng (Hình 2). Sự phát triển của sợi nấm tốt nhất khi có đường sucrose, với đường kính khuẩn lạc là 57,3 mm, tiếp theo là mannose, glucose và fructose. Sucrose và maltose là những oligosaccharide duy nhất hỗ trợ sự phát triển tốt, trong đó sucrose là chất vượt trội. Arabinose, galactose và lactose không thể hỗ trợ sự phát triển của sợi nấm so với đối chứng. Ba polysaccharid đã được thử nghiệm (dextrin, inulin và tinh bột hòa tan) cho phép sợi nấm phát triển tốt.

Hình 2: Ảnh hưởng của nguồn carbon đến sự phát triển sợi nấm của P. linteus trong môi trường nền

Mỗi nguồn cacbon được thêm vào môi trường cơ bản đến nồng độ 0,1M.

Đường kính khuẩn lạc được đo sau 14 ngày ủ.

Mật độ sợi nấm: C; nhỏ gọn, SC; hơi nhỏ gọn, ST; hơi gầy, T; gầy.

5. Ảnh hưởng của nguồn nitơ đến sự phát triển của sợi nấm

Trong số chín nguồn nitơ được thử nghiệm, sự phát triển sợi nấm của P. linteus là tốt nhất trên môi trường được bổ sung kali nitrat, với đường kính khuẩn lạc được ghi nhận là 82,2 mm, tiếp theo là natri nitrat và amoni tartrat (Hình 3). Không có sự phát triển của sợi nấm rõ ràng khi có natri nitrit, trong khi hầu như không phát hiện được sự phát triển khi có amoni sulfat và urê.

Hình 3: Ảnh hưởng của nguồn nitơ đến sự phát triển của sợi nấm trong môi trường cơ bản

Mỗi nguồn nitơ được thêm vào môi trường cơ bản đến nồng độ 0,1M..

Đường kính khuẩn lạc được đo sau 14 ngày ủ..

Mật độ vật chất: C; nhỏ gọn, SC; hơi nhỏ gọn, ST; hơi gầy, T; gầy.

6. Lựa chọn cây tối ưu để trồng nấm thượng hoàng

Để chọn cây tối ưu cho việc trồng nấm P. linteus, tỷ lệ C / N của bảy loại mùn cưa khác nhau được đo sau 40 ngày ủ. Tỷ lệ C / N là cao nhất trong mùn cưa của Poplus tomentiglandulosa (Suwon-poplus), tiếp theo là Pinus sp., Alnus japonica và Castanea ctrenata (Chestnut) trước khi cấy (Hình 4). Hình 4 tóm tắt sự giảm tỷ lệ C / N sau 40 ngày ủ. Tỷ lệ mùn cưa của cây Dâu tằm (Morus alba) giảm nhẹ, trong khi tỷ lệ mùn cưa của A. japonica và P. tomentiglandulosa giảm rõ rệt. Vì vậy, khúc gỗ của cây Dâu đã được chọn để trồng nấm P. linteus. Ngoài ra, P. linteus là một loại nấm lâu năm sống tự nhiên trên cây Dâu tằm, với tỷ lệ C / N giảm nhẹ là điều hiển nhiên.

Hình 4: Tỷ lệ C / N của các môi trường mùn cưa khác nhau sau khi nuôi cấy P. linteus

Tỷ lệ C / N được đo sau 40 ngày ủ P. linteus.

7. Ảnh hưởng của các phương pháp cấy meo nấm lên sự xâm nhập của hệ sợi nấm trên các khúc gỗ

Để chọn một phương pháp cấy hiệu quả cho việc nuôi cấy nhân tạo nấm thượng hoàng P. linteus, người ta đã so sánh các phương pháp cấy ghép bằng phương pháp khoan, cắt khúc gỗ, và phương pháp cấy vào khúc gỗ ngắn đã khử trùng. Kết quả Các khúc gỗ ngắn đã được khử trùng là tốt nhất cho việc chạy sợi nấm, trong khi phương pháp cấy truyền dạng khoan và phương pháp cấy ghép vào cuối khúc gỗ không thích hợp cho việc trồng nấm P. linteus vì tỷ lệ khuẩn lạc ban đầu thấp (<7%) (Hình 5). Nhiều mô hình cấy đã được sử dụng ở Nhật Bản và Hàn Quốc để trồng nấm. Theo truyền thống, phương pháp cấy truyền vào lỗ khoan và phương pháp cấy ghép vào đầu log đã được sử dụng cho Lentinus edodes và Ganoderma spp. gần đây đã được tiến hành trồng trọt, và việc cấy nấm ngắn đã khử trùng được tiến hành như một quy trình sửa đổi cho việc trồng nấm.

Hình 5: Ảnh hưởng của các phương pháp cấy khác nhau đến sự xâm nhập của sợi nấm

Tỷ lệ phụ thuộc ban đầu được đo lường sau 1 tháng ủ.

8. Ảnh hưởng của kích thước khúc gỗ đến sự phát triển của sợi nấm trong khúc gỗ

Để xác định kích thước khúc gỗ thuận lợi cho sự xâm nhập của nấm, P. linteus được nuôi cấy trên các khúc gỗ có độ dài khác nhau như được mô tả trong phần Vật liệu và Phương pháp. Tỷ lệ khuẩn lạc ban đầu của sợi nấm là 30 ~ 40% sau 2 tháng ủ bệnh, nhưng tỷ lệ khuẩn lạc hoàn toàn là 5 ~ 17%. Tỷ lệ thuộc địa của sợi nấm có xu hướng tăng lên khi các khúc gỗ có chiều dài ngắn hơn. Do đó, những khúc gỗ dài khoảng 20 cm chứng tỏ thích hợp cho việc trồng nấm P. linteus. Tuy nhiên, tỷ lệ khuẩn lạc đầy đủ sợi nấm trên các khúc gỗ này không vượt quá 17% (Hình 6).

Hình 6: Ảnh hưởng của kích thước khúc gỗ đến sự xâm nhập của nấm P. linteus

Tỷ lệ khuẩn lạc sợi ban đầu được đo sau 2 tháng ủ.

Tỷ lệ khuẩn lạc đầy đủ được đo sau 4 tháng ủ.

9. Ảnh hưởng của độ ẩm đến sự phát triển của sợi nấm

Để xác định độ ẩm khúc gỗ thích hợp cho sự xâm nhập của sợi nấm, độ ẩm của cây Dâu tằm là 35%, 40% và 42% đã được thiết lập. Sau 4 tháng ủ, sợi nấm phát triển rõ rệt. Tỷ lệ khuẩn lạc đầy đủ của sợi nấm là 20% và 25% là rõ ràng đối với độ ẩm lần lượt là 35% và 40%. Tỷ lệ phụ thuộc vượt trội thể hiện rõ ở độ ẩm 42% (Hình 7). Khi độ ẩm tăng lên, tỷ lệ khuẩn lạc đầy đủ của sợi nấm có xu hướng tăng lên và sợi nấm có xu hướng trở nên nhỏ gọn hơn. Tuy nhiên, tỷ lệ khuẩn lạc đầy đủ của sợi nấm là dưới 27%, tương tự như ở P. pini (Rew và cộng sự, 2000).

Hình 7: Ảnh hưởng của độ ẩm trong gỗ lên sự phát triển của sợi nấm

Tỷ lệ khuẩn lạc đầy đủ được đo lường sau 4 tháng ủ.

Mật độ chu kỳ: +; kém, ++; tốt.

10. Ảnh hưởng của thời gian khử trùng

Sử dụng phương pháp cấy vào khúc gỗ ngắn đã được khử trùng, sự hình thành khuẩn lạc của sợi nấm được quan sát thấy trên các khúc gỗ sau 6 tháng ủ. Tỷ lệ khuẩn lạc ban đầu và khuẩn lạc sợi nấm hoàn toàn là tốt nhất khi triệt sản trong 14 giờ (tương ứng là 98% và 85%) ( Hình 8). Nói chung, môi trường lỏng được hấp tiệt trùng bằng cách khử trùng tiêu chuẩn ở 121 ℃ (15 psi) trong 15 phút và nền mùn cưa trong 90 phút. Mặt khác, các kết quả này cho thấy rằng các túi polyetylen chứa đầy các khúc gỗ để nuôi cấy P. linteus cần phải được khử trùng ở 121 ℃ trong hơn 12 giờ. Các thông số khử trùng cần được điều chỉnh tùy thuộc vào bản chất và khối lượng của chất nền, và hoạt động của nấm.

Hình 8: Ảnh hưởng của thời gian khử trùng đến sự phát triển của nấm

Tỷ lệ khuẩn lạc ban đầu được đo sau 2 tháng ủ.

Tỷ lệ khuẩn lạc đầy đủ được đo lường sau 6 tháng ủ.

11. Ảnh hưởng của chất bổ sung và thời gian ủ đến sự sinh sống của sợi nấm

Việc bổ sung các chất bổ sung vào các khúc gỗ ngắn đã dẫn đến tỷ lệ nấm đầy đủ cao và mật độ sợi nấm được nén chặt nhanh hơn so với đối chứng (Hình 9). Trong số các chất bổ sung được sử dụng, tỷ lệ nấm mốc đầy đủ và mật độ sợi nấm tốt nhất khi bổ sung bao gồm lá cây Dâu tằm – cám gạo (4: 1; v / v). Để khảo sát thời kỳ ủ bệnh thuận lợi nhất của các khúc gỗ để hình thành quả thể, các khúc gỗ được ủ từ 3 ~ 6 tháng. Các khúc gỗ chôn trong đất trước 4 tháng ủ đã bị nhiễm các loại nấm không mong muốn. P. linteus pinhead không hình thành. Các kết quả này cho thấy các khúc gỗ được cấy để trồng nấm P. linteus cần được ủ ít nhất 5 tháng (Hình 10).

Hình 9: Ảnh hưởng của các chất bổ sung khác nhau đối với sự phát triển của sợi nấm

Tỷ lệ khuẩn lạc đầy đủ sợi nấm được đo sau 3 tháng ủ.

Mật độ chu kỳ: +; kém, +++; gọn nhẹ.

Ảnh hưởng của thời gian ủ đến việc hình thành quả thể
Hình 10: Ảnh hưởng của thời gian ủ đến việc hình thành quả thể

quả thể hình thành: -; không hình thành, +; một số hình thành.

12. Ảnh hưởng của nhiệt độ canh tác, độ ẩm tương đối và độ sâu chôn vùi đến sự phát triển của quả

Đã khảo sát ảnh hưởng của nhiệt độ nhà canh tác đến sự hình thành quả thể. Đầu nhọn của quả thể trên các khúc gỗ được chuyển đến nhà trồng nấm được kiểm soát ở 31 ~ 35 ℃ đã hình thành tốt, trong khi không hình thành ở 21 ~ 25 ℃ (Hình 11). Các khúc gỗ thuộc địa chôn trong đất trong nhà nuôi trồng nấm ở độ ẩm tương đối 96 ~ 99% tạo ra quả thể tốt, trong khi quả thể không hình thành ở độ ẩm tương đối 81 ~ 90% (Hình 12). Các khúc gỗ đã được cố định tốt và được chôn thẳng đứng với độ dài một phần tư hoặc một phần hai chiều dài của chúng trong đất tỏ ra ưu việt đối với sự hình thành các đầu nhọn (Hình 13), trong khi hình thành quả thể ở độ sâu trong đất. Độ sâu chôn của các khúc gỗ có quan hệ mật thiết với độ ẩm tương đối trong điều kiện nhà trồng nấm. Nếu độ ẩm tương đối của tình trạng nấm. Nếu độ ẩm tương đối của nhà trồng nấm không đủ thì đỉnh quả thể hình thành trên đất gần đó, ngược lại, nếu đủ thì đỉnh quả thể hình thành trên các phần trên của khúc gỗ.

Hình 11: Ảnh hưởng của nhiệt độ trong nhà canh đến sự hình thành quả thể

tạo thành quả thể: -; không hình thành, +; một số hình thành, ++; hình thành tốt.

Hình 12: Ảnh hưởng của độ ẩm tương đối đến sự hình thành quả thể của P. linteus

tạo thành quả thể: -; không hình thành, +; một số hình thành, ++; hình thành tốt.

Hình 13: Ảnh hưởng của độ sâu chôn khúc gỗ đến sự hình thành đầu nhọn của quả thể

tạo thành quả thể: -; không hình thành, +; một số hình thành, ++; hình thành tốt.

Các cơ quan của nấm thượng hoàng P. linteus fruting hình thành sau một năm nuôi cấy. Basidiocarps được trồng trong 2 năm trên các khúc gỗ có hình như móng ngựa, không cuống, kích thước 144 × 71 mm và thân nấm cứng. Bề mặt trên của hạt basidiocarps có hình zonat đồng tâm và nông, và có màu hạt dẻ sẫm.

IV. Kết luận về điều kiện phát triển tốt nhất cho nấm thượng hoàng Phellinus linteus

Điều kiện tối ưu cho sự phát triển của sợi nấm thượng hoàng Phellinus linteus ATCC 26710 được xác định là khúc gỗ có chiều dài khoảng 20 cm, nhiệt độ 30 ℃ và pH là 6,0. Môi trường này tạo điều kiện rất tốt cho sự phát triển của sợi nấm, tối ưu lượng đường sucrose, mannose và glucose (được cung cấp dưới dạng nguồn carbon). Kali nitrat và natri nitrat là nguồn nitơ hỗ trợ sự phát triển tốt của sợi nấm. Các kỹ thuật có thể sử dụng để cấy vi nấm thượng hoàng P. linteus trên các khúc gỗ: trên các khúc gỗ ngắn đã khử trùng, cấy vào lỗ khoan hoặc kỹ thuật cấy ghép kiểu kẹp sandwich vào khúc gỗ đã được sử dụng. Chỉ cấy vào khúc gỗ ngắn đã khử trùng mới tạo ra khuẩn lạc tốt của sợi nấm. Sự phát triển ban đầu của sợi nấm và toàn bộ hệ sợi nấm tốt nhất trên các khúc gỗ 20 cm có độ ẩm 42%. Sự phát triển sợi ban đầu của nấm thượng hoàng P. Linteus được đẩy nhanh hơn 12 giờ. Sự hình thành basidiocarp là tối ưu khi sử dụng phương pháp chôn khúc gỗ sau 5 ~ 6 tháng, và sự hình thành quả thể vượt trội hơn trong điều kiện nhà trồng 31 ~ 35 ℃ và độ ẩm tương đối cao hơn 96%.

Trên đây là nghiên cứu về các yếu tố ảnh hưởng khi trồng nấm thượng hoàng. Kính chúc mọi người nhân giống được loại nấm dược liệu tuyệt vời này!

Mọi chi tiết xin liên hệ:

Kiến Phúc Đường

Trụ sở chính: 906 Ct6, Văn Khê, Hà Đông, Hà Nội. Điện thoại: 0866.833.863

Chi nhánh Hải Phòng: 160 Trần Thành Ngọ, Kiến An, Hải Phòng. Điện thoại: 0912.462.575

Email: info@kienphucduong.vn

Website: https://kienphucduong.vn

Chúc các bạn có nhiều sức khỏe và niềm vui và thành công trong cuộc sống !

Tham khảo thêm cách trồng nấm sò

Hướng dẫn trồng nấm sò cơ bản

Bài viết thuộc bản quyền Kiến Phúc Đường và Câu lạc bộ Yêu Thiên Nhiên

Trả lời